험시 주의 사항 1) DNA추출시에는 여러 가지방법이 있다. 이온 강도 또는 pH에 약간의 차이만 있어도 DNA 조각의 이동속도에 크게 영향을 주기 때문이다. 1> DNA 분자의 크기가 클수록 느리게 이동한다. 5> 전기장의 방향도 이동속도에 영향을 미친다. * Gel에 ethidium bromide가 함유되어 있으면 전기영동하는 동안 어느 시기에나 자외선하에서 관찰이 가능하다.. 6> Ethidium bromide는 DNA 이동속도를 15% 정도 감소시킨다. 4> 부하되는 전압이 높을수록 이동속도가 빠르다. 3> DNA 형태(구조)에 따라 이동속도가 다르다. 일반적으로 supercoiled DNA가 가장 빨리,, open circular DNA의 순으로 빠르게 이동한다.DNA 증폭실험 DNA 증폭실험을 실시하고 실험보고서를 작성하였습니다. 실험도구 3. 따라서 실험에 사용하는 대상에 맞는 추출방법을 사용해야 한다. 2 kb보다 큰 DNA 조각들의 분리를 최대로 하기 위해서는 agarose gel에 5 V/cm 이상의 전 압을 부하시켜서는 안된다. DNA증폭실험 1. 실험 목적 ......
DNA 증폭실험
DNA 증폭실험을 실시하고 실험보고서를 작성하였습니다. DNA증폭실험
1. 실험 목적
2. 실험도구
3. 실험시 주의 사항
4. 실험 방법
3. 실험시 주의 사항
1) DNA추출시에는 여러 가지방법이 있다. 따라서 실험에 사용하는 대상에 맞는 추출방법을 사용해야 한다.
2) 전기영동시 DNA의 이동속도는 다음과 같은 영향을 받는다.
1> DNA 분자의 크기가 클수록 느리게 이동한다.
2> Agarose의 농도가 높을수록 느리게 이동한다.
3> DNA 형태(구조)에 따라 이동속도가 다르다. 일반적으로 supercoiled DNA가 가장 빨리, 그다음 linear DNA, open circular DNA의 순으로 빠르게 이동한다.
4> 부하되는 전압이 높을수록 이동속도가 빠르다.
5> 전기장의 방향도 이동속도에 영향을 미친다.
6> Ethidium bromide는 DNA 이동속도를 15% 정도 감소시킨다.
7> 전기영동 완충용액의 성분과 이온강도도 전기영동 속도에 영향을 준다
3) 전기 영동시 주의 사항
* 낮은 전압에서 선형으로 된 DNA 조각의 이동속도는 부하되는 전압에 비례한다. 그러나, 전기장에서 전류의 흐름이 커짐에 따라 높은 분자량을 가진 DNA 조각의 이동속도는 빨라지게 되므로 전압이 올라감에 따라 agarose gel에서 DNA 분리 효과가 감소된다. 2 kb보다 큰 DNA 조각들의 분리를 최대로 하기 위해서는 agarose gel에 5 V/cm 이상의 전 압을 부하시켜서는 안된다.
* 전기영동 tank와 gel은 동일한 전기영동 완충액을 사용해야 한다. 이온 강도 또는
pH에 약간의 차이만 있어도 DNA 조각의 이동속도에 크게 영향을 주기 때문이다.
* Gel에 ethidium bromide가 함유되어 있으면 전기영동하는 동안 어느 시기에나
자외선하에서 관찰이 가능하다.
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