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세포 생물학 실험 - pH 변화에 따른 Enzyme의 Activty

 

1. 실험제목 : pH 변화에 따른 Enzyme의 Activty

2. 날짜:

3. 실험원리

pH란 Potential of Hydrogen

어떤 물질의 산성, 알칼리성의 정도를 나타내는 수치. 수소이온(H+) 활동도의 척도.

pH 〓 - pH가 7보다 낮으면 산성, 높으면 염기성

 

짝산 &짝염기

어떤 화합물이 양성자를 잃고 나서 생기는 물질을 짝염기(Conjugate loase)라고 한다.

어떤 화합물이 양성자를 받아 들여서 생기는 물질을 (Conjugate acide) 라고 한다.

 

Enzyme 이란

생명체 내부의 화학 반응을 매개하는

단백질 촉매 (생체 내에서 대사반응을 촉매하기 위해 전문화된 단백질)

효소는 기질과 결합하여 효소-기질 복합체를 형성함으로써 반응의 활성화E를 낮추는 촉매

역할을 한다. 흔히 그들이 작용하는 기질의 이름에 아제 (-ase)를 붙여 부르곤 한다.

[단위]

Unit(U) 최적 환경에서 1 기질을 1분간 1의 생성물로 바뀌게 하는 효소의 양

 

효소의 기질 특이성

효소가 특정한 기질과 결합하여 반응을 촉매 하는 성질

효소들은 각기 다른 형태의 활성화 부위를 가지고 있다. 그러므로 효소는 자신의 활성부위 에 알맞게 결합하는 특정한 기질과 상호작용을 할 수 있다.

 

알파-아밀라아제 ()

아밀라아제의 한 종류로 셋 이상의 (1.4) 연결 포도당 단위를 가지는 다당류에서 (1.4) 글리코시드 결합을 가수분해 시키는 효소이다.

녹말 말토오즈

Buffer(완충용액)

: 산과 염기를 가해도 공통이온효과에 의해 용액pH가 크게 변하지 않는 용액을 말한다.

# 가장 좋은 완충용액은 혈장

 

오늘 실험 Buffer 용액 제조 준비 - 와 이용하여 만듦

(Monopotassium Phosphate : pH4.5 ~ pH5, Fw 〓 136.09)

(Dipotassium Phosphate : pH8이상, Fw 〓 174.18)

버퍼 pH5 만들 때 : base

버퍼 pH7 만들 때 : base

[ 각각 80ml 씩 만들 때 50mM을 만들려면 ]

〓 0.544g

174.18g/1000ml 〓 1M

1.7418g/10ml 〓 1M

13.9344g/80ml 〓 1M

13.9344g x 0.05 /80ml 〓 1M x 0.05

0.69672g/80ml 〓 0.05M 〓 50mM

〓 0.69g,

136.09g/1000ml 〓 1M

1.3609g/10ml 〓 1M

10.8872g/80ml 〓 1M

10.8872g x 0.05 /80ml 〓 1M x 0.05

0.5443g/80ml 〓 0.05M 〓 50mM

 

4. 실험방법

 

(1) Buffer 용액제조

 

1. 먼저 와 를 각각 50mM 80ml를 …(생략)

 

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